控制人员流动，为最关键的措施。根据检测证实：手术室浮游菌降落的数量在手术过程中有明显变化，其特点为：手术开始时细菌降落量最大，结束时又出现一个峰值。这说明，人员流动是手术室空气中细菌数量变化的主要原因。
禁止患病人员参与手术。
限制手术台上翻动病人：病人在进入手术室前应脱去鞋袜，换清洁衣裤并戴帽子。手术前脱去衣裤，尽量减少病人在手术台上的翻动，有必要反动病人盖单时要尽量轻柔，以免带菌漂浮物沉降于无菌手术区。
手术间的门户管制：手术进行中尽量减少人员活动，更不应开启通向外走廊的门户。严防污染空气进入。
洁污控制：无菌手术与污染手术必须分室，如果不得不同室进行，应先行无菌手术，后做污染手术。接台手术人员在2台之间需严格进行刷手，消毒手臂及更换无菌手术衣、手套。2台手术之间，应尽量做好环境净化和药液湿式消毒，包括湿试地面。 服装要求：医护人员进入室内前必需戴好能将头发全部盖住的清洁帽子；衣服要能遮盖全身皮肤，戴好专用的清洁口罩，覆盖整个口鼻。
卫生清洁：手术间除每日手术前、后进行湿式卫生清洁外，每周至少一次彻底清扫。每月做一次细菌培养，以检测净化效果，并分析不合格原因，找出改正措施。
